小鼠單核巨噬細胞需要怎樣的培養(yǎng)條件？

　　小鼠單核巨噬細胞是機體重要的免疫細胞，具有抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等重要作用。①抗感染：非特異性吞噬殺傷多種病原微生物，是機體非特異性免疫防御中的重要細胞。②提呈抗原、啟動免疫應答：在特異性免疫應答中，絕大多數(shù)TD抗原（胸腺依賴抗原）都需經(jīng)巨噬細胞吞噬和加工處理，并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復合物，表達在細胞膜表面，提呈給T細胞。巨噬細胞表面有很多黏附分子，可與T細胞表面的協(xié)同刺激分子受體結(jié)合，產(chǎn)生協(xié)同刺激信號，誘導T細胞的活化，啟動免疫應答。③抗腫瘤：巨噬細胞被某些細胞因子如IFN-γ激活后能有效地殺傷腫瘤細胞，是參與免疫監(jiān)視的重要效應細胞。④免疫調(diào)節(jié)：在特異性免疫應答中，巨噬細胞可分泌釋放多種細胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)。

　　

　　小鼠單核巨噬細胞具有較廣泛的造血活性，可刺激中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞的增殖、分化和功能活性。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細胞減少。用于異體或自體骨髓移植，加速骨髓功能恢復，亦用于骨髓異常增生綜合征。

　　

　　小鼠單核巨噬細胞的培養(yǎng)環(huán)境與一般貼壁細胞并無差異。即培養(yǎng)箱溫度為37℃，CO2濃度為5%。推薦的培養(yǎng)基為DMEM+10%的胎牛血清；實際上，經(jīng)研究者們實驗發(fā)現(xiàn)高糖型DMEM培養(yǎng)的RAW264.7細胞傳代后貼壁更快、細胞生長速度更快。因此，推薦使用高糖型DMEM，F(xiàn)BS濃度為10%，作為RAW264.7細胞的培養(yǎng)基。

　　

　　關(guān)于RAW264.7細胞的傳代方法，ATCC推薦使用細胞刮刀。也可采用0.25%的胰酶消化或采用彎嘴吸管吹打等方法。采用細胞刮刀進行傳代時，細胞能較大限度被收集起來，但會對細胞造成機械性損傷、影響細胞形態(tài)及貼壁時間等。采用胰酶消化時，由于RAW264.7細胞貼壁較牢，消化時間就較長。但消化時間點不易把握，易消化過度，對細胞生長造成抑制。