細胞學堂 | 293細胞系家族譜系大揭秘

HEK293細胞的歷史可以追溯到1973年，當時荷蘭萊頓大學的Alex Van Der Eb博士和Frank Graham博士在研究人類腺病毒（Adenovirus）時培養了這種細胞，細胞命名中的數字可以追溯到他的第293次實驗產生的原始細胞克隆這一事實。通過腺病毒5（Ad5 DNA）進行了轉染，由于存在Ad5 E1A/B基因，使其細胞周期以及細胞表型、核型等發生了改變，獲得永生化特性，在生產腺病毒載體和腺相關病毒載體、生產蛋白、疫苗、抗癌試劑以及細胞生物學研究上廣泛應用。

目前為止，HEK293細胞有多種衍生細胞系，每種細胞系的特點不盡相同，用途也存在著差異。今天小普給大家介紹下有關293T、293F、293H和293S四大分支細胞的特點及用途。

HEK293細胞系及其衍生/歷史的示意圖

HEK293T

它是HEK293細胞系的亞克隆，經過修飾表達SV40 T抗原，其表達的SV40T抗原可以實現外源表達載體的擴增，最終增加目的基因表達，常用于慢病毒、逆轉錄病毒及腺病毒的包裝。

HEK293H

來自表達E1A腺病毒基因的HEK293細胞，粘附性較強，常用于噬菌斑檢測實驗和重組蛋白的表達和生產。在293H細胞中插入EBNA-1基因可得到293E，該基因含有EBV復制起點（oriP）的重組表達載體，能夠在H293E細胞中復制，顯著提高蛋白的表達；293-6E細胞是在293-H細胞表達截斷的EBNA1，其能夠在無血清培養體系中進行蛋白表達及病毒載體的生產。

HEK293F

由HEK293細胞系衍生的一個可以在無血清培養基中快速增長的細胞系，可以高效表達蛋白。由293F細胞導入pCMVSPORT6TAg.Neo質粒可獲得293FT，可以用于生產慢病毒載體和基因編輯等領域。293FTM細胞是由Flp-InTM T-RExTM 293細胞導入單嗜性（ecotropic）報告質粒和MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap) 報告質粒獲得，常用于蛋白互作篩選。

HEK293S

用逐漸適應性培養的方法，將細胞馴化成能夠懸浮培養且耐受低Ca²⁺培養的細胞系，即293S細胞。293S細胞用甲烷磺酸誘變和蓖麻毒素選擇修飾，再轉染pcDNA6/TR質粒，得到293SG細胞，常用于同源的N-糖基化蛋白的表達。此外，該細胞系中具有四環素表達抑制基因，也可用于四環素誘導的蛋白表達研究。；用pcDNA3.1-zeo-STendoT質粒對293SG細胞進行轉化，得到293SGGD細胞，用于糖基化工程研究中。