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培養細胞時，由于培養的環境各不相同，同時細胞各階段的形態也存在一定差異，沒有一個確定的參照物去比對，很多老師同學也無法確定自己所養細胞的狀態是否正常。
那么如何判斷細胞狀態是正常還是異常呢？本期細胞學堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學會這幾招，輕松辨別細胞狀態！
01 如何判斷細胞活率
臺盼藍是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性，可以檢測出細胞是否存活。正常的活細胞，胞膜結構完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。
通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經死亡。活細胞不著色，而死細胞會被染成藍色。
(無色為活細胞，藍色為死細胞)
染色時間不能太長，3分鐘內觀察，超時后活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結果出現偏差。
在顯微鏡下觀察細胞形態：
懸浮細胞
活細胞透亮有光澤，死細胞暗淡無光且膜碎裂；
貼壁細胞
活細胞可貼壁且膜完整，死細胞不能貼壁。
（紅色圈為死細胞；綠色圈為活細胞；箭頭為血清雜質）
細胞膜作為判斷細胞活性的標準之一，有的老師用“邊界清晰"來界定，認為邊界不清晰則是細胞狀態變差，實際情況我們也有發現部分細胞膜邊緣很薄再加上顯微鏡不清晰導致誤判，所以小普認為膜邊界是否清晰并不是金標準，我們更傾向于以細胞膜完整性作為判斷標準，“膜完整"則為活細胞。
（該細胞膜邊緣薄透，若為黃光顯微鏡可能看不清）
02 如何判斷細胞形態異常
1
你的細胞應該長成什么樣?
在懷疑細胞形態改變之前，我們首先得知道一個正常的細胞應該是什么樣的，誠如每顆多肉都會有其獨-特的色彩和習性，細胞也有其獨-特的習性，包括生長速度、形態、培養環境等；
2
從哪幾個方面判定細胞形態異常？
細胞的微環境會導致細胞形態改變，例如血清直接影響細胞的形態：
HK-2細胞顯微圖（無血清培養基培養）
HK-2細胞顯微圖（MEM +10%FBS培養）
是否所有的形態改變都可以被定義為異常呢？答案是否定的。從上述例子中可以看出，兩種培養環境下細胞形態不同，但狀態都并無異常，因此我們需要視不同情況、綜合細胞增長速度進行評判：
未更換培養體系時
在培養體系沒有更換的前提下，細胞碎裂增多，黑點增多、形態改變、生長速度變慢，則應考慮外源刺激物導致，可能已被污染，需排查污染源，并做針對性的預防措施。
更換了培養體系時
1
如果是因為更換了培養體系后導致的細胞形態改變，在細胞生長速度正常的情況下，可正常培養；
2
如果細胞更換培養條件后，嚴重變形甚至貼壁減少且不能正常傳代，必須進行干預，可通過包被培養瓶促進貼壁、增加血清濃度、與原培養基混合使用讓細胞過渡適應等方式進行改善；
3
如果細胞對于新環境反應激烈，直接死亡，則需更換培養體系；
03 如何判斷細胞污染
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