C2C12 (小鼠成肌細胞)資源：提供完整溯源數(shù)據(jù)與培養(yǎng)指南

C2C12細胞是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞克隆；C2C12細胞分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2（BMP-2）處理C2C12細胞，會導致C2C12細胞的分化途徑從成肌細胞轉換為成骨細胞。檢測表明，C2C12細胞肢骨發(fā)育畸形病毒（鼠痘）陰性。

別稱：C2c12;C2-C12;C12
種屬：小鼠
生長特性：貼壁細胞
細胞形態(tài)：成肌細胞樣
凍存條件：凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
：溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認）：生長培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS+1% P/S
：培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例：1:3-1:6
推薦換液頻率：2-3次/周
組織來源：骨骼肌；品系：C3H
細胞類型：自發(fā)永生化細胞
生物安全等級：BSL-1
保藏機構：ATCC; CRL-1772 BCRC; 60083 BCRJ; 0058 DSMZ; ACC-565

注意事項

1. 該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔。

2. 換液時需預熱培養(yǎng)基。

3. 收貨如有大塊脫落的細胞團，為正常現(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。

常見問題

Q1:你們實驗室有沒有驗證過C2C12細胞成肌管實驗？

測試過，普諾賽實驗室分別用2%、4%、6%的馬血清誘導C2C12細胞3~7天，均出現(xiàn)明顯的肌管，其中6%馬血清誘導會更快出現(xiàn)肌管，使用的馬血清貨號：164215。實驗存在很多影響因素，我們總結了下面幾點影響實驗成敗的因素： (1)細胞傳代密度控制，C2C12細胞增殖較快，建議70~80%密度進行傳代，每次都讓細胞長得過滿可能會影響后續(xù)誘導實驗。 (2)馬血清品質和濃度，不同品牌、批次的馬血清對C2C12誘導的效果差異明顯，馬血清誘導濃度一般在2~10% 。 (3)誘導前細胞密度控制，我們驗證了細胞70%密度開始換馬血清進行誘導，效果良好。 (4)器皿貼壁性，不同器皿貼壁性存在差異，為了確保細胞誘導過程中的貼壁狀態(tài)，建議使用貼壁性較好的器皿，或者使用0.1%明膠包被器皿使用。 (5)誘導周期，大部分情況下，C2C12細胞會在誘導3-7天出現(xiàn)明顯肌管，如果誘導8-10天還未出肌管，實驗可能不太成功，需要重新安排實驗。 (6)預防污染，細胞污染可能導致實驗失敗，比如細菌污染、真菌污染或者支原體污染。

Q2:C2C12細胞傳代比例和消化時間如何判斷？

建議傳代比例控制在1：3~1:4，這樣既能保證細胞有足夠的生長空間，又能避免細胞生長緩慢的問題。消化時間一般為1~2分鐘，但具體時間需要根據(jù)實際情況調整。消化時間不宜過長，否則會導致細胞損傷而漂浮過多。消化過程中應密切觀察細胞的狀態(tài)，鏡下觀察細胞圓縮分散，細胞開始脫落即可終止消化。如果細胞生長較快，為了避免頻繁傳代，可以適當降低傳代密度。

Q3:為什么不能讓C2C12細胞長得過滿或出現(xiàn)堆積？

C2C12細胞生長速度較快，如果不及時傳代，細胞會長滿培養(yǎng)瓶并開始堆積，甚至成片脫落。為了避免這種情況，建議在細胞密度達到70%~80%時進行傳代。

Q4:C2C12細胞培養(yǎng)是否可以等到95%以上的密度再進行傳代？

C2C12細胞生長較快，這個細胞正常培養(yǎng)的時候不建議細胞出現(xiàn)高度匯合的情況，95%的密度極容易長過飽和后漂浮，可能影響后續(xù)實驗。

C2C12細胞引用文獻

• Muscle-derived small extracellular vesicles induce liver fibrosis during overtraining(2025)

  期刊：Cell Metabolism

  DOI：10.1016/j.cmet.2024.12.005

  影響因子：27.7

  引用產品： 青霉素-鏈霉素溶液（雙抗），100×, C2C12 細胞, Hepa 1-6 細胞, LX-2 細胞

• Scalable production of muscle and adipose cell-laden microtissues using edible macroporous microcarriers for 3D printing of cultured fish fillets(2025)

  期刊：Nature Communications

  DOI：10.1038/s41467-025-57015-1

  影響因子：14.7

  引用產品： C2C12 細胞, Jurkat, Clone E6-1 細胞, 小鼠脂肪間充質干細胞完-全培養(yǎng)基, 小鼠脂肪間充質干細胞