THP-1細(xì)胞吞噬功能驗證：乳膠顆粒與紅細(xì)胞實驗

THP-1細(xì)胞（別名：THP-1(ATCC)、Tohoku Hospital Pediatrics-1等）是一種源自人急性單核細(xì)胞白血病的小鼠單核細(xì)胞系，具有典型的單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞特性。作為懸浮生長的腫瘤細(xì)胞，THP-1廣泛用于免疫調(diào)控、炎癥反應(yīng)、吞噬功能及單核細(xì)胞分化研究，是免疫學(xué)與腫瘤學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)實驗?zāi)Ｐ汀?/p>

核心特性

種屬：人（Homo sapiens）
組織來源：急性單核細(xì)胞白血病；單核細(xì)胞起源
生長特性：懸浮生長，需離心收集（禁止直接傾倒培養(yǎng)液）
細(xì)胞形態(tài)：圓形或橢圓形單核細(xì)胞，大小均一
生物安全等級：BSL-1（常規(guī)實驗室安全操作）

培養(yǎng)方案

培養(yǎng)基配方

• 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：RPMI-1640（[PM150110]）

• 添加物： 

• 10% FBS（[164210]）

• 0.05 mM β-巰基乙醇（關(guān)鍵成分，維持細(xì)胞活性）

• 1% 雙抗（青霉素-鏈霉素，[PB180120]）

• 無需額外成分：配方完整，直接使用

培養(yǎng)條件

• 氣體環(huán)境：空氣（95%）+ CO?（5%）

• 溫度：37℃

• 推薦傳代密度：5×10? – 1×10? cells/mL

• 換液頻率：每2-3天更換半量培養(yǎng)基（懸浮細(xì)胞無需消化）

關(guān)鍵注意事項

1. 懸浮細(xì)胞操作： 

• 傳代或換液時需低速離心（800-1000 rpm，5 min）收集細(xì)胞，禁止直接傾倒培養(yǎng)液。

• 復(fù)蘇后需靜置1-2小時，待細(xì)胞沉降后再輕柔混勻。

2. β-巰基乙醇必要性：該成分對THP-1活性至關(guān)重要，不可省略。

3. 密度監(jiān)控：細(xì)胞密度超過1×10? cells/mL時需及時分瓶，避免營養(yǎng)耗竭。

4. 凍存與復(fù)蘇： 

• 凍存液：無血清非程序凍存液（[PB180438]），無需緩慢降溫，直接-80℃過渡后轉(zhuǎn)入液氮。

• 復(fù)蘇要點：快速融化（37℃水浴），離心去除凍存液后重懸。

生物學(xué)功能與應(yīng)用場景

• 吞噬與抗原呈遞：可吞噬乳膠顆粒、酵母聚糖及調(diào)理過的紅細(xì)胞，適用于吞噬功能研究。

• 分化誘導(dǎo)：佛波醇酯（PMA/TPA）可誘導(dǎo)THP-1分化為巨噬細(xì)胞樣表型，用于炎癥模型構(gòu)建。

• 免疫調(diào)控研究：表達補體C3受體與Fc受體，適用于抗體依賴性細(xì)胞毒性（ADCC）研究。

• 疾病模型：模擬單核細(xì)胞在白血病、動脈粥樣硬化等疾病中的行為。

背景與來源

• 細(xì)胞起源：從1歲男性急性單核細(xì)胞白血病患兒外周血中分離建立，表面無免疫球蛋白表達。

• 功能驗證：XC斑點形成試驗陰性，無病毒顆粒分泌。

• 保藏信息：ATCC（TIB-202）、DSMZ（ACC-16）、ECACC（88081201）權(quán)-威機構(gòu)保藏。

推薦操作流程

1. 傳代步驟： 

• 收集細(xì)胞懸液，800-1000 rpm離心5 min，棄上清。

• 加入新鮮培養(yǎng)基重懸，按1:2-1:4比例分瓶。

2. 凍存技巧： 

• 收集對數(shù)期細(xì)胞，離心后用預(yù)冷凍存液重懸，直接-80℃保存24小時后轉(zhuǎn)入液氮。

3. 計數(shù)與接種： 

• 使用血球計數(shù)板或自動細(xì)胞計數(shù)儀，維持密度在5×10? – 1×10? cells/mL。

THP-1細(xì)胞以其穩(wěn)定的懸浮生長特性與明確的巨噬細(xì)胞分化潛能，成為免疫與腫瘤研究中的核心工具。嚴(yán)格遵循離心收集與β-巰基乙醇添加要求，可最大限度維持細(xì)胞功能與實驗可重復(fù)性。