小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞關(guān)鍵特性詳解

核心優(yōu)勢

• 功能完整性：保留表面活性物質(zhì)（二棕櫚酰卵磷脂）分泌能力，完-美模擬體內(nèi)肺泡生理功能

• 高純度保障：經(jīng)SP-C（肺泡表面活性蛋白C）免疫熒光鑒定，純度≥90%，附完整質(zhì)檢報告

• 無菌保障體系：通過14天微生物全項檢測（支原體/細(xì)菌/真菌），HIV-1/HBV/HCV陰性認(rèn)證

• 組織特異性：精準(zhǔn)分離自肺泡區(qū)域，完整保留Ⅱ型細(xì)胞特征性結(jié)構(gòu)（嗜鋨性板層小體）

關(guān)鍵特性詳解

細(xì)胞形態(tài)與功能

• 典型立方形或圓形上皮細(xì)胞樣結(jié)構(gòu)，頂端突入肺泡腔

• 胞質(zhì)內(nèi)富含嗜鋨性板層小體（直徑0.1-1.0 μm），內(nèi)含平行排列的板層狀磷脂結(jié)構(gòu)

• 分泌表面活性物質(zhì)，降低肺泡表面張力（維持呼氣時肺泡開放，吸氣時防止過度膨脹）

增殖與傳代

• 可傳代1-2代，建議接種密度為3×10? cells/cm2

• 具有分化為Ⅰ型肺泡細(xì)胞的潛能，可用于肺損傷修復(fù)研究

冷凍保存

• 程序降溫+含DMSO保護(hù)液的標(biāo)準(zhǔn)化流程，解凍后細(xì)胞活力≥80%

技術(shù)創(chuàng)新

雙酶定向消化技術(shù)

• 膠原酶Ⅰ（200U/mL）+ 中性蛋白酶（0.1%）聯(lián)合處理

• 37℃振蕩消化25min，精準(zhǔn)分離肺泡上皮層

• 差速貼壁法去除成纖維細(xì)胞污染（貼壁時間差20min）

質(zhì)量控制

七維質(zhì)檢體系

1. 形態(tài)學(xué)鑒定：倒置顯微鏡觀察典型Ⅱ型細(xì)胞特征（泡沫狀胞質(zhì)、板層小體）

2. 表面標(biāo)記檢測：SP-C/Prospero轉(zhuǎn)錄因子（SP-C是Ⅱ型細(xì)胞特異性標(biāo)記）

3. 功能驗證：嗜鋨性板層小體電鏡觀察及表面活性物質(zhì)分泌檢測

4. 微生物檢測：PCR+培養(yǎng)法雙重驗證無菌狀態(tài)

5. 活力檢測：臺盼藍(lán)排除法確保細(xì)胞活性

6. 遺傳穩(wěn)定性：STR基因型分析排除交叉污染

7. 交叉污染檢測：ISO認(rèn)證細(xì)胞庫比對確認(rèn)種屬特異性

應(yīng)用場景

肺疾病模型構(gòu)建

• 肺纖維化模型（TGF-β1誘導(dǎo)）

• 急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）模型（LPS刺激）

• 表面活性物質(zhì)功能障礙相關(guān)疾病（如新生兒呼吸窘迫綜合征）

藥物開發(fā)與毒性測試

• 表面活性物質(zhì)替代療法藥物篩選

• 肺泡上皮屏障通透性改變相關(guān)藥物評價

• 納米顆粒肺部沉積與毒性研究

再生醫(yī)學(xué)研究

• 肺損傷修復(fù)機(jī)制探究（Ⅱ型細(xì)胞向Ⅰ型細(xì)胞分化）

• 干細(xì)胞分化為肺泡上皮細(xì)胞的誘導(dǎo)體系優(yōu)化

培養(yǎng)體系優(yōu)化

專用培養(yǎng)基CM-M003

• 基礎(chǔ)成分：DMEM/F12 + 5%優(yōu)質(zhì)FBS（低內(nèi)毒素）

• 生長因子：KGF（角質(zhì)細(xì)胞生長因子，10ng/mL）+ EGF（5ng/mL）

• 保護(hù)添加劑：谷氨酰胺（2mM）+ 抗氧化劑（0.5mM）

• 特殊添加物：1% ITS（胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒）

培養(yǎng)建議

1. 包被處理：鼠尾膠原Ⅰ（2-5 μg/cm2）預(yù)處理培養(yǎng)器皿

2. 換液策略：初始48h靜置培養(yǎng)，之后每2天半量換液

3. 傳代時機(jī)：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)70-80%時，用0.25%胰酶（含EDTA）消化